北京普天同创生物科技有限公司
先在培养皿底部铺一张直径略小于培养皿的圆形滤纸,在滤纸上放一根U形玻棒和一块盖玻片,棒上搁置一片洁净载玻片,盖上皿盖后按常规包扎灭菌。此培养皿称为湿室。
将无菌察氏培养基试管在水浴中熔化,待冷却至50℃左右加人待观察的霉菌抱子,摇匀后迅速用无菌滴管吸取少许抱子琼脂混合液,滴加在湿室内载玻片中央。培养基滴加量宜少,外形应圆而薄(直径约5mm)。
将镊子在火焰上灼烧灭菌后,取原放在皿内的盖玻片盖在培养基上,然后用镊子轻轻压几下,以使盖玻片与载玻片间的距离相当接近(不超过1/4mm)。
为防止在培养过程中琼脂干燥,在滤纸上加注3mL20%无菌甘油,以保证湿室内的适宜湿度。
盖上培养皿盖,在皿上标明菌种、日期、接种人,置于28℃恒温箱中培养2-3d。
将培养好的载玻片取出,将背面擦干,直接置于显微镜下进行观察。观察时,开始不得压盖玻片,以防形态失去完整性和自然性,待整体观察完毕,可轻轻压盖玻片后观察内部结构。
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