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铁皮石斛愈伤组织及试管苗挥发油的气相色谱一质谱比较分析

发布时间:2016-03-11 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:546
铁皮石斛(Dendrobiumofficinale)为兰科植物,药用部位为其干燥茎,是2010版《中国药典》收载的品种之一,具有益胃生津,滋阴清热的功效。其主要有效成分为石斛类多糖和生物碱,此外还有菲类、倍半萜类、酚类化合物等,现代药理研究发现石斛多糖具有抗肿瘤、降低血糖、增强免疫力等作用。近年来,国内外对铁皮石斛多糖和生物碱成分的研究报道较多,但对挥发油的研究较少,仅见对铁皮石斛花挥发性成分的报道,对其愈伤组织和试管苗挥发性成分的研究未见报道。为了有效利用铁皮石解资源,开发愈伤组织和试管苗,首次采用固相微萃取的方法对铁皮石斛愈伤组织和试管苗挥发性成分分别进行萃取,利用气相色谱一质谱联用技术和计算机辅助系统对其挥发性成分分别进行定性、定量分析。
1.条件
进样口温度250℃;柱温50℃;柱内载气流量1.69mL/min;载气为高纯度氦气(99.999%);升温程序:从50℃开始保持5min;以8℃/min升温至110℃;再以5℃/min升温至170℃;最后以8℃/min升温至220℃,保持2min;RTX-5MS型弹性石英毛细管色谱柱0.25mm×30m×0.25μm;不分流进样。
2.质谱条件
电子能量7eV;离子源温度200℃;接口温度250℃;电子轰击离子源为EI;
倍增器电压0.9kV;溶剂延时3.5min;扫描范围40-600m/z。
3.挥发油的提取
取预先准备好的存放在-80℃冰箱中的铁皮石解愈伤组织和试管苗,液中研磨成粉并迅速精密称取0.8g装入固相微萃取专用采样瓶中,并加入2mL超纯水,插入装有65μmPDMS/DVB纤维头的手动进样器,磁力搅拌速度为1000r/min,60℃下顶空萃取40min取出,快速插入色谱仪进样口(250℃)中,解析附5min。
4.结果与讨论
通过以上方法分析最后确定了铁皮石解愈伤组织挥发油中的24个化合物和试管苗中19个化合物,分别占总峰面积的61.64%和66.12%。实验结果表明,铁皮石斛愈伤组织挥发性成分主要是醛类、烷烃类、烯烃类、酮类、醇类和酯类,分别占其挥发油总成分的29.17%、25.0%、25.0%、12.5%、4.17%和4.17%;试管苗挥发性成分主要是烷烃类、醛类、烯烃类和酮类分别占其挥发油总成分的36.84%、26.32%、21.05%和15.79%。铁皮石斛愈伤组织挥发油的主要成分是石竹烯(26.92%)、γ-榄香烯(8.25%)、1-乙烯基-1-甲基-2,4-二(1-
甲基乙烯基)-[15,(l.a,2.β,4.β)]-环己烷(6.55%)、a-石竹烯(3.26%)、(Z)-7,11-二甲基-3-甲基-1,6,10-十二碳三(3.09%)、反-2-辛烯醛(3.06%)等;试管苗挥发油的主要成分是反-2-辛烯醛(20.28%)、β-紫罗兰酮(11.82%)、反-2-己烯醛(8.27%)、(E)-壬烯(6.9100)、石竹烯(4.92%)等。
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