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无菌器材的选择原则与灭菌包装

发布时间:2015-11-20 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:727

一、常用耗材的无菌商品及其规格

以下主要介绍常用耗材的无菌商品的种类及其规格。

目前,尚有操作者习惯传统的DIY操作规程准备灭菌包装的器材。如玻璃刻度移液管在严格清洗后,使用不锈钢消毒筒包装,每筒包装20支左右,然后经高压蒸汽灭菌、干燥等环节,收纳于洁净间内备用,或经干热灭菌,降温后存放于洁净间内备用。

(一)一次性移液器械

1.独立灭菌包装刻度移液管

一次性刻度移液管一般是采用独立灭包装。常用的刻度移液管是1m1、2m1、5ml、10ml、50ml等规格,由无细胞毒性的工程塑料为原料制备。无菌包装中,加装滤芯以便在使用时产生滤过除菌空气。生产包装后,经过气体灭菌或辐照灭菌处理。使用前,确认无菌包装完整无破损。发现包装破损的,需弃用。移液管的无菌包装包括预装棉芯、纸塑密封包。

2.独立灭菌包装长丝滴管

长丝滴管,又称长丝吸管,分刻度滴管或无刻度滴管,也是由无细胞毒性的工程塑料为原料制备。无菌包装中,有的加装滤芯以便产生滤过除菌空气;或者形状为非吸液端密封的吸管。生产包装后,均预先经过气体灭菌或辐照灭菌处理。

无菌操作中一次性使用。使用前,需确认无菌包装是否完整无破损。

3.盒装灭菌微量移液器吸嘴

吸嘴包装于吸嘴盒内,再密封包装成每个1盒或若干盒,经过气体灭菌或辐照灭菌处理。吸嘴材料属于无细胞毒性的工程塑料。有些产品已经加装空气滤芯,因此,在无菌操作过程中,可以大大降低微生物污染的可能性。通常1盒有50-200μl或50-300μl吸嘴96支,或1盒有5000μ1吸嘴24支。

少量使用时,选择每个吸嘴盒为独立灭菌包装的商品,使用比较方便。用量比较多时,可以选择1个灭菌包装有若干个吸嘴盒的商品,价格成本会低一些。
一旦开封使用,吸嘴盒连同余下的无菌吸嘴需要摆放在洁净度高的环境,如摆放在超净工作台内。摆放时间太长,不能确保吸嘴的无菌状态时,则放弃,不再使用。

(二)一次性细胞培养用器皿

组织培养(TC)表面处理的聚苯乙烯是负电荷、亲水性的表面,其细胞吸附与蛋白结合的能力非常稳定,这提供了非常好的表面供细胞生长,尤其适合贴壁细胞培养。未处理的聚苯乙烯是没有电荷的、疏水性的表面,其细胞吸附与蛋白结合的能力非常差,结果是细胞吸附与生长非常弱与不稳定,适合悬浮细胞培养。

非离子疏水性表面(NBS)则表面分子相互作用最低,对蛋白和核酸的吸附极低,适用于低浓度的蛋白和核酸分析,可以提高信噪比。

产品预先经气体灭菌或γ射线辐照灭菌,这些培养用器皿包括多孔细胞培养板、培养方瓶、培养皿。

1.独立灭菌包装多孔细胞培养板

依据使用目的不同,多孔细胞培养板可以是6孔、12孔、24孔、48孔、%孔、384孔和1536孔。96孔细胞培养板分平底、U形底和V形底等类型。

细胞培养板一般用原生的聚苯乙烯材料制造,要求无细胞毒性,对培养细胞的活性无明显影响,不宜使用聚苯乙烯的再生料生产的多孔板进行细胞培养。另外,要求通光性能良好,不影响镜检操作。

96孔细胞培养板一般用于进行克隆化细胞培养或细胞药理毒理试验,24孔板用于细胞传代培养,6孔板则用于细胞扩大培养或原代培养。

2.灭菌包装细胞培养方瓶

按提供细胞生长的面积分类,如25cm2、75cm2、150cm2、175cm2、225cm2等为常用规格。

小规模培养中,常用的是25cm2和75cm2生长面积两种规格。

3.灭菌包装培养皿

规格有φ35mm、φ60mm、φl00mm、φ150mm和φ245mm等,应采用无细胞毒性的工程塑料制备。

(三)其他无菌容器

1.无菌离心管

灭菌包装的外螺旋盖刻度离心管,锥形底,常用的是15ml和50m1规格。每个灭菌包装有25支或50支。建议一次性使用这些塑料离心管,以免影响试验数据。

2.无菌Eppendorf管

Eppendorf管有联体按盖,根据容量差异,0.5ml、1.0ml和2.0ml为常见产品。

在动物细胞培养中使用的Eppendorf管,通常用于无菌分装已滤过除菌的细胞培养用液,方便冷冻保存和使用。

要求预先灭菌,可以直接购买灭菌Eppendorf管。

3.无菌冻存管

常用1.8ml规格,是由无细胞毒性的工程塑料制备。

二、其他耗材的无菌产品及其规格

其他耗材的无菌商品的种类及其规格还有许多,下述品种也常常使用到。

(一)无菌针头滤器

配合一次性无菌注射器使用,用于少量制备滤过除菌的药液或其他培养用液。

(二)一次性无菌注射器

属于医疗产品,一次性无菌注射器的规格有lml、2ml、5ml、10ml、20ml和50ml等,一般独立灭菌包装。灭菌形式可以是其他灭菌,也可以是辐照灭菌。

(三)灭菌包装细胞刮刀或细胞铲

用于收集贴壁生长的细胞,独立无菌包装。直接与细胞接触,要求无细胞毒性。

三、无菌耗材的选择原则

建议选择大品牌公司的相关产品,这些产品有广泛的用户群,面市时间长,制作工艺水平高,材料无细胞毒性小。

对于未明用料是否存在细胞毒性,是否存在影响使用的工艺缺陷等因素时,购买时尤其注意慎重选择。由于价格方面的优势考虑时,最好经过试用评价,否则会对实验、生产带来不可挽回的重大损失。

理想的选择原则应该体现出合理的性价比。

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